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<p>La transcriptase inverse M-MLV est un ADN polymérase recombinant qui synthétise un brin d’ADN complémentaire à partir d’ARN premier brin, d’ADN ou d’ARN / ADN hybride. Comparée à l’AMV RT, la transcriptase inverse du virus de la leucémie murine de Moloney (RT M-MLV) est dépourvue de toute activité de l’endonucléase d’ADN et affiche une activité RNase H inf...
See moreérieure. Fonctions de cette enzyme :<br />
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• <strong>Thermostabilité</strong> : activité optimale à 37°C<br />
• <strong>Taille de l’ADNc</strong> : M-MLV peut être utilisée pour synthétiser l’ADNc premier brin jusqu’à 7 kb<br />
• <strong>Applications</strong> : synthèse d’ADNc premier brin, extension de l’amorce, séquençage de l’ADNc, bibliothèques ADNc et RT-PCR<br />
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<strong>Source</strong><br />
purifié à partir d’<em>E. coli</em> exprimant le gène <em>pol</em> de M-MLV sur un plasmide<br />
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<strong>Tests de performance et de qualité</strong><br />
pureté SDS-PAGE ; tests d’endodésoxyribonucléase, d’exodésoxyribonucléase et de ribonucléase ; et rendement et longueur du produit ADNc<br />
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<strong>Définition d’unité</strong><br />
une unité de RT M-MLV représente la quantité d’enzyme requise pour incorporer 1 nmol de désoxyribonucléotide dans une substance précipitable à l’acide, en 10 minutes, à 37°C, en utilisant poly(A) oligo(dT)25 comme modèle/amorce.<br />
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<strong>Conditions de réaction des unités</strong><br />
50 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 40 mM de KCl, 6 mM de MgCl2, 1 mM de DTT, 0,5 mM de [3H]dTTP, 0,1 mM de poly(A), 0,1 mM d’oligo(dT)25, 0,1 mg/ml de BSA et enzyme dans 50 µl pendant 10 min à 37°C.</p>
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